1. 显微镜下可见黑色细沙状颗粒，部分细菌可能会有明显的定向移动；

2. 细菌多呈球状或杆状，形态较为规则，均匀分布；

3. 爆发速度较快，通常1-2天就能看到明显变化，如培养基变浑浊、pH改变（酚红指示剂颜色异常），可能伴随异味；

4. 细菌大量繁殖会消耗营养、分泌毒素，导致胞内颗粒增多、细胞形态改变、细胞增殖减缓甚至大面积死亡。

1. 定期清洁实验室、培养箱和超净台，严格执行无菌操作规范；

2. 轻度污染时可以尝试用高浓度双抗（如5×或10×）清洗细胞，更换新鲜培养基后继续观察；若培养基明显浑浊或细胞已大面积死亡，建议直接丢弃并进行彻底消杀；

3. 一旦发现污染，立即更换培养基、血清、PBS、胰酶等试剂及耗材，并系统排查潜在污染来源。

二、真菌污染

1. 早期培养基保持澄清透亮不浑浊，不易察觉，对局部细胞影响较大；

2. 随着污染加重，形成肉眼可见的絮状漂浮物，呈白色或黄色小团，镜下可见链球状、丝状、管状或者树枝状的菌丝；

3. 真菌产生的孢子，可通过空气传播，极易污染其他细胞，甚至蔓延至整个实验室。

1. 维持细胞房相对湿度在40%-60%，实验结束后及时清理废弃物，避免真菌滋生；

2. 真菌污染较难清除且易传播，一旦污染不建议保留，应消杀后丢弃；

3. 真菌污染需对培养箱、超净台和实验室进行全面消杀，确保杀灭真菌孢子。

1. 显微镜下可见细胞间隙有不规则黑点，无明显运动；

2. 细胞状态变差、形态改变（呈拉丝样），增殖速度变慢，最终漂浮甚至死亡；

3. 培养基通常保持澄清，无异味。

1. 定期对培养细胞进行支原体检测，常用方法包括PCR法、显色法、荧光染色法等；

2. 若细胞感染支原体后状态尚佳，可使用支原体清除试剂处理，直至检测转阴；若污染严重，则建议消杀后丢弃。

若细胞状态尚佳，可尝试使用黑胶虫清除试剂处理，直至细胞恢复稳定；若细胞状态太差，建议消杀后丢弃。

五、细胞交叉污染

1. 同种属细胞鉴定：采用STR鉴定。若检测结果显示多等位基因数大于3个及以上，可考虑有交叉污染可能。需结合细胞本身的遗传背景，如EA.hy 926为融合细胞，本身就包含两套遗传信息；

2. 不同种属细胞鉴定：采用PCR法对种属特异性基因进行扩增，通过产物大小差异进行区分；

3. 处理方式：若确定细胞发生交叉污染，建议重新引种细胞。