肿瘤细胞具有极强的增殖能力，在一个适宜的环境中就能够实现细胞增殖分裂，裸鼠成瘤就是常见的验证肿瘤细胞体内增殖的模型。下面就由长沙医学实验外包公司湘元生物实验室来给大家说说如何进行裸鼠成瘤实验吧！

实验步骤：

第一步：细胞准备

收集处于对数生长期的健康肿瘤细胞（这是确保高成活率的基础），使用胰酶消化细胞，当细胞变圆但尚未脱落时，立即停止消化，长沙医学实验外包公司湘元生物实验室提醒，这是为了避免过度损伤细胞。

第二步：细胞悬液制备

弃去胰酶，加入PBS（磷酸盐缓冲液）轻轻吹打制成细胞悬液。离心后，用新鲜PBS重悬细胞，调整浓度至(1-2)×10⁷个细胞/mL。制备过程需保持细胞活力和均一性。

第三步：皮下注射

左手稳定抓取裸鼠，在左侧腋窝处（也可选择腹股沟、侧腹部或颈背部）进行皮肤消毒。使用胰岛素注射器或1mL注射器，针头斜刺入皮下约1厘米，缓慢推入200μL细胞悬液。

第四步：观察与取材

将动物放回笼内正常饲养，通常7-10天后可见明显肿瘤形成，后续对动物实施安乐死，取出肿瘤进行后续分析。

常见问题：

1、瘤子长不出来怎么办？

可能原因：细胞状态差、细胞系本身成瘤性弱、小鼠年龄偏大或存在免疫排斥。

解决方案：长沙医学实验外包公司湘元生物实验室建议可以优化细胞培养条件，确保细胞活力；对难成瘤细胞系，可尝试添加Matrigel或增加接种量（最高可达5×10⁶细胞/只）等。

2、肿瘤形状不规则怎么办？

可能原因：注射技术不到位。

解决方案：长沙医学实验外包公司湘元生物实验室建议可以在注射时保持针头稳定，注射后稍作停留再缓慢拔针，这样可有效避免细胞悬液在皮下形成条索状分布。

好了，关于裸鼠成瘤实验的问题就说这么多了，如果还有不懂的或者是其他实验咨询的，直接联系长沙医学实验外包公司湘元生物实验室客服老师，24小时在线免费咨询~