WB实验步骤多、耗时长，即使是比较简单的电泳环节，你只要稍没注意可能影响最终的实验结果，今天，长沙医学实验外包公司湘元生物实验室就跟大家好好说说，WB电泳阶段遇到这样的问题该怎么做吧！

电泳操作要点：

1、确保上样一致性：在进行上样时，必须确保每个加样孔的上样体积保持一致，这样可以避免蛋白条带出现水平不齐的情况。长沙医学实验外包公司湘元生物实验室提醒，上样时记得缓慢添加样品，避免快速吹打导致样品溢出。

2、电泳液的使用：内槽需要被电泳液填满，而外槽则只需填至1/4处，对于不同厚度的玻璃板，上样量也有所不同。

3、合理设置电压：电压的设置需要根据环境温度来调整，室温较高时，就要适当降低电压；温度较低时，则需提高电压。此外，长沙医学实验外包公司湘元生物实验室还要提醒大家，在夏季高温时，可以将电泳槽放入冰水中进行降温，以防止凝胶发生变形。

常见问题分析：

1、电泳带扭曲或歪斜：可能是电泳液未加足或漏液了，所以大家要及时检查和补充电泳液。

2、电泳带出现拖尾现象：一般是因为样本未能充分溶解。

3、电泳带向两侧过度扩散：通常是由于上样量过多所引起。

4、溴酚蓝呈笑脸状：当制胶试剂温度过高或制胶后未能及时保湿时，就会导致胶层不均匀，从而使得溴酚蓝呈现特殊的笑脸形状。长沙医学实验外包公司湘元生物实验室建议，可以在进行电泳时，降低电压并调节电泳速度，同时确保电泳过程在冰浴条件下进行，以减少胶层不均匀的情况。

5、电泳条带不整齐：可能是由于胶凝固不均匀、胶的下边缘存在气泡、上样buffer浓度不准确或拔梳子时操作不当等导致，大家要仔细排查。

6、电泳条带过粗：可能是由于上样量过大、浓缩胶未能有效浓缩、浓缩胶的pH值不准确或电压过高所导致。

好了，关于WB实验中电泳阶段的问题就说这么多了，如果你还有不懂的或者是其他实验咨询的，也可以直接联系长沙医学实验外包公司湘元生物实验室客服老师，24小时在线免费咨询~