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做动物实验好几个月了,为什么我的肿瘤成瘤模型构建还是失败?

做动物实验好几个月了,为什么我的肿瘤成瘤模型构建还是失败?这已经是今天第3个人问我了,确实,对于新手来说,动物实验想做好,并不是一件容易的事情,尤其是肿瘤成瘤模型这块,很多人做的时候,失败率还是非常高,老是不成功。


所以,今天就和长沙动物实验外包公司湘元生物一起来学习下吧!


动物实验模型-肿瘤成瘤模型:肿瘤成瘤模型包含皮下成瘤和原位成瘤,以Hep-G2细胞裸鼠成瘤为例,实验步骤如下:


肿瘤成瘤模型构建第一步:培养肿瘤细胞(Hep-G2细胞),一般选择对数生长期肿瘤细胞进行移植,长沙动物实验外包公司湘元生物提醒:肿瘤细胞消化后需尽快接种到裸鼠皮下,取出裸鼠期间可将细胞悬液放置到水冰混合物上。


肿瘤成瘤模型构建第二步:细胞接种量,如果不好确定该肿瘤细胞接种量,可查找相关文献参考。皮下荷瘤细胞数量/体积可1-5*106/0.1 ml/注射点的范围内选择。长沙动物实验外包公司湘元生物提醒:注射体积100 μL或200 μL均可,超过200 μL可能会漏液。


肿瘤成瘤模型构建第三步:裸鼠的选择,裸鼠一般选择4-8周龄,体重18-20 g左右,长沙动物实验外包公司湘元生物提醒:同批实验鼠要保证个体差异小,同时根据实验需求选择裸鼠性别。


肿瘤成瘤模型构建第四步:裸鼠固定和麻醉,根据裸鼠体重腹腔注射麻醉药物,待进入安静状态后,将其仰卧固定。


肿瘤成瘤模型构建第五步:肿瘤细胞接种,根据皮下成瘤或原位成瘤选择注射部位,注射完成后缓慢退针,用PBS棉球止血。长沙动物实验外包公司湘元生物提醒:皮下种植部位选择供血丰富区域,如腋窝中后部、腹股沟中上部等。


肿瘤成瘤模型构建第六步:继续培养:手术裸鼠放归培养前需给予抗生素注射,同时做好伤口消毒,注意观察裸鼠健康状态,防止其死亡。


肿瘤成瘤模型构建第七步:处死裸鼠:解剖,观察目标组织肿瘤生长状况,周围其他器官是否有转移瘤形成。所有可疑组织均做好标记,拍照,若有表面结节,计数后,冻于液氮中。根据结果情况用10 %甲醛溶液固定过夜后做病理。也可取出目标组织,福尔马林中低温(-80 ℃)保持待测。


好了,以上就是长沙动物实验外包公司湘元生物对于肿瘤成瘤模型构建实验的详细说明了,大家还有疑问的,可直接咨询客服,24小时在线免费咨询!




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