为什么TUNEL染色可以用来进行细胞凋亡检测呢？这是因为细胞在发生凋亡时会激活一些DNA内切酶，这些内切酶可以使染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端，可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT）的作用下，将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端，从而可通过荧光显微镜或者流式细胞仪对凋亡细胞进行检测。

TUNEL染色进行细胞凋亡检测的实验步骤大家都清楚，这里就不详细说了，但是实验过程中有几点问题大家要注意：

1、一定要做到充分脱蜡和水化：脱蜡和水化不充分，会对最后的细胞凋亡检测数据造成很大的影响，在这里，长沙的生物、医学实验公司湘元生物建议实验中，脱蜡可以先 60oC 20 min，再用使用二甲苯两次 5-10 min；而水化则是用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗，这样做，后面的结合反应就会更加充分、均匀。

2、细胞通透的时间要把握好：长沙的生物、医学实验公司湘元生物进行细胞凋亡检测实验时，一般会根据切片的厚薄来选择合适的蛋白酶k的孵育时间，切片厚度越厚，所需的时间也就越长。

3、TUNEL染色进行细胞凋亡检测时，可以适当延长下TUNEL 反应液的时间。

4、PBS要充分清洗：在 TUNEL 反应后和酶标反应后，PBS要充分清洗，不要简单的随便洗洗就可以了，因为PBS清洗程度直接影响到后面的切片的非特异性着色问题，所以一要得充分清洗。

5、血细胞含量多的组织，应当适当延长封闭时间和升高过氧化氢的浓度：对于肝脏、肾脏等这类血细胞含量多的组织，TUNEL染色进行细胞凋亡检测时, 长沙的生物、医学实验公司湘元生物建议，适当延长封闭时间和升高过氧化氢的浓度，以便达到更好的封闭效果，放心，这样做并不会影响到最终的特异性染色。

好了，关于TUNEL染色法来进行细胞凋亡检测的注意事项就说到这了，大家还有疑问的，可直接咨询长沙生物实验室湘元生物公司的客服，24小时在线免费咨询！

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