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细胞实验服务之流式检测注意事项细胞周期cell cycle 是指从一次细胞分裂形成子细胞开始到下一次细胞分裂形成子细胞为止所经历的过程,它反映了细胞增殖的速度。在临床上,有很多研究证明,细胞周期分析对人肿瘤的诊断预后具有很高的价值。 流式细胞周期(cell cycle)检测相关的实验操作,相信大家都有了解,这里就不过多赘述,今天我们就重点来说下细胞实验服务之流式细胞周期(cell cycle)检测中的一些注意事项! 细胞实验服务之流式细胞周期(cell cycle)检测注意事项一: 实验中,建议选择6孔板操作,细胞给药密度在60%左右,但如果收样时,孔内细胞已经明显观察到细胞漂浮凋亡,那对流式检测的结果会有很大的影响。流式细胞术收样时,尽量保证孔内细胞还未漂浮。 细胞实验服务之流式细胞周期(cell cycle)检测注意事项二: 收样时,建议选用胰酶消化,消化时间必须严格控制,及时终止消化,消化时间太久,容易对细胞造成损伤和死亡。 细胞实验服务之流式细胞周期(cell cycle)检测注意事项三: 收集细胞时,离心机选用4℃,350×g离心5分钟,小心吸去上清。加入预冷的PBS,用手指将管内的细胞弹匀,再加入1 mL预冷的75%乙醇(-20℃预冷)中,轻轻吹打混匀。4℃固定过夜。 细胞实验服务之流式细胞周期(cell cycle)检测注意事项四: 进行实验时,首先4℃,1000×g离心5分钟,弃去乙醇溶液。此时格外需要注意的是,离心后细胞不是全部沉淀在管底,管壁上也会存在大量细胞,去上清一定要注意。加入周期试剂盒的染色液,37℃避光染色30分钟以上,上机测试前最好使用200目筛网过筛,以免细胞聚集堵塞机器管道。 |