众所周知，细胞铺板不均匀的话，是会影响我们后续的干预效果和实验检测结果的。但是，这看似简单的细胞铺板实验操作，并不是所有人都能完美应对.....

那孔板铺板不均匀的可能原因有哪些呢？这个问题又该怎么解决呢？下面就和靠谱的长沙医学科研实验外包公司湘元生物实验室一起来学习下吧~

原因一、板材质量有问题

板材质量不行的话，是可能导致铺板不均匀的，你想想，质量差的孔板可能在“出厂”的时候就存在“疙瘩”，这里凸一块，那里凹一块的，这样制造上导致孔板的不均匀就会后期导致我们铺板不均。

解决方法：更换高质量的板材。至于那种更好，大家可以问你的前辈们或者去看文献里用得比较多的是哪种，大家选的多的，肯定更好一些，这里小编就不推荐了~大家根据实际情况选择就好。

原因二、细胞悬液混合不均匀

如果在转移细胞悬液到孔板的过程中未能充分混合，细胞会成团集中在悬液底部，导致铺板不均匀。

解决方法：充分混合细胞悬液即可。操作步骤：在转移细胞悬液到孔板之前，确保用移液器多次上下吹打细胞悬液，使其均匀悬浮，此外，在铺板过程中，定期晃动悬液所在的瓶子，有助于保持细胞均匀分布。

原因三、铺板操作/技术有问题

尤其是小白，错误的操作会直接导致你的铺板失败，以下是几种有效的铺板技巧，大家可以学习下。

十字摇匀法：在铺板后，轻轻地前后、左右摇动六孔板，形成“十字”摇匀。这种方法可以帮助细胞悬液均匀分布在整个孔底，而不是集中在中心或边缘。

浸润孔底法：在铺板前，先用少量基础培养基浸润孔底，然后再加入细胞悬液。这样可以避免悬液集中在中间或边缘，有助于细胞均匀分布。

显微镜检查：在铺板后，使用显微镜检查细胞分布情况。如果发现不均匀，可采取敲击法，轻轻敲击板子的边缘，使细胞分散均匀。（PS：敲击力度不宜过大，次数不宜过多，以免再次引起细胞聚集，而且记得，静置一段时间后再放入培养箱，有助于细胞自然沉降，提高均匀度。）

原因四、细胞状态不好

细胞的状态不佳，如消化不足或过度，也是会导致铺板不均匀的，所以我们实验前一定要尽量保障细胞处于良好状态，最好活力满满。

解决方法：优化细胞消化步骤。确保在消化过程中，细胞分散成单细胞悬液，并保持活力。

好了，细胞铺板不均匀的问题解决了，如果大家对实验还有不明白的，或者是需要实验协助指导的，可以直接咨询靠谱的长沙医学科研实验外包公司湘元生物实验室客服，24小时在线免费咨询。